1. 準備工作

- 確認實驗目的：是檢測抗原還是抗體。

- 確認所需要的材料，如樣品、緩沖液、洗滌液、酶標二抗、底物等。

- 準備實驗設(shè)備，如酶標儀、洗板機、移液器、培養(yǎng)板等。

- 將試劑從4℃冷藏或者-20℃冷凍處取出，退冰至室溫。

2. 樣本和試劑準備

- 根據(jù)需要配置緩沖液和其他試劑。

- 準備樣品：可能需要稀釋或處理樣品以適應(yīng)實驗設(shè)計。

- 預處理微孔板：如果使用預包被板，通常不需要額外處理。

3. 樣品加入

- 使用移液器準確加入樣品到微孔板的孔中。

- 添加對照樣品，包括陰性對照和陽性對照。

4. 孵化

- 按照說明書上的時間和溫度條件進行孵化。

- 有的步驟可能需要在溫育后進行洗板，去除未結(jié)合的物質(zhì)。

5. 檢測

- 添加酶聯(lián)抗體和底物，對于含有酶標記的抗體或者抗原進行檢測。

- 再次孵化，允許底物與酶反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化或發(fā)光。

6. 結(jié)果讀取

- 使用酶標儀讀取各孔顏色變化的強度，測定吸光度（OD值）。

- 結(jié)果通常與對照曲線相比較，以確定樣品中的目標分子濃度。

7. 結(jié)果分析

- 將數(shù)據(jù)記錄下來，并使用適當?shù)能浖M行分析。

- 根據(jù)制造商提供的標準曲線計算樣品中的抗原或抗體濃度。

8. 清理和維護

- 遵照生物安全規(guī)定處理微孔板和其他試驗材料。

- 清潔實驗設(shè)備和工作區(qū)域，為下次實驗做好準備。

注意事項：

- 仔細閱讀試劑盒說明，在實驗前進行必要的準備。

- 嚴格按照說明操作，避免交叉污染。

- 注意試劑的有效期和存儲條件。

- 使用適當?shù)纳锇踩僮饕?guī)程處理樣品和廢棄物。